Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的全过程中逐渐扩展

从第一次经常出现口内自身免疫球蛋白质到经常出现1标准型高血压病理高血压的成果率在孩童后期就有较好的描绘出，多个口内自身免疫球蛋白质感染性的孩童中会有70%在血液转换后10年内患上高血压，而随访15年的孩童这一平均值增高到84%。相比之下之下，占病理1标准型高血压一半以上的标准型1标准型高血压的确诊机制还没获取充分的数据比对。

越来越多的人开始用到分段系统来界定1标准型高血压的成果：生物本体在经常出现多种口内自身免疫球蛋白质时离开第1过渡阶段，经常出现血糖异常时离开第2过渡阶段，经常出现高血压时离开第3过渡阶段。一些多发口内自身免疫球蛋白质感染性的生物本体，在1期和2期，成果速度快，并发展为确诊的1标准型高血压。我们此前描绘出了一三组在首次监测到多种口内自身免疫球蛋白质结果辨识后非常不算10年无高血压的快得多成果者，这三组高血压人数不算，但相似性非常明确。随后，我们断定口内自身蛋白质抗本体CD8+T细胞内反理应在成果比较慢的高血压中会前提不存在，但在最近确诊和长年存在的高血压高血压中会很容易监测到。这可能会说明了，与成果高血压相比之下，这些高血压自身免疫反理应的调节增强。

更早数据比对说明了，尽管调节性T细胞内(Treg)数量正常，但高血压高血压存在一些特性缺陷，其中会包含对IL-2的反理应潜能提高。此外，高血压高血压中会的振荡CD4+T细胞内可能会对调节更加具抵抗性，表现为振荡T细胞内的抑止消退，自然导致的Treg和本体外导致的诱导Treg，以及蛋白质经历的CD4+T细胞内中会IL-2反理应消退。本数据比对的目标是描绘出了CD4+调节性T细胞内(Treg)在一个大正因如此比较慢成果者中会的相似性，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访间隔时间为18-32年。

法则：BOX数据比对是一项以人群为基础的纵向数据比对，在21岁下述住院的高血压亲属中会检查和1标准型高血压的险恶各种因素。我们此前描绘出了长年比较慢成果者的相似性，他们始终保持多重口内自身免疫球蛋白质感染性超过10年，但没经常出现高血压的病理高血压，慢性或非同步进行性自身免疫。随后，10名暂时始终保持无高血压并想要提供大量血液结果辨识的比较慢成果者划入T和B细胞内特性比对。在迄今为止的数据比对中会，8名慢成果者(SP三组)，中会位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁彼此之间的口内自身免疫球蛋白质感染性。所有的举例来说都受制于1标准型高血压成果的1期，尽管一些人随后失去了口内自身免疫球蛋白质对某些蛋白质的感染性反理应，然而，一名高血压之前受制于2期非常不算6年，但没经常出现病理高血压，一名高血压被诊断为高血压，该受试者72岁，在采自实验结果辨识时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据比对中会对该小分叔父同步进行了单独评核。转化外周血单个核细胞内(PBMCs)，采用多参数流式细胞内心法和T细胞内抑止测试评核小分叔父中会Treg的增益、表标准型和特性。用到FlowSOM和CITRUS(聚类深入研究、表征和回归)同步进行无都由聚类比对，评核Treg表标准型。

结果：与心理健康小分叔父相比之下，来自慢成果本体的梦境CD4+T细胞内的都由聚类辨识，作用于的梦境CD4+ Treg增益增高，与糖皮质激素诱导的TNFR系统性蛋白质(GITR)隐含增高有关。一名HbA1c升高的高血压与成果比较慢者和归一化的对照三组相比之下，Treg谱并不相同。特性比对说明了，与心理健康小分叔父相比之下，来自比较慢成果本体的Treg介导的CD4+振荡T细胞内抑止明显损害。表现为对振荡CD4+T细胞内CD25和CD134隐含的抑止增高。

绘出1 深入的表标准型比对辨识，CD4+Treg亚标准型在慢成果路由表中会增高。由FlowSOM转化成的Treg室，聚集在来自所有小分叔父的活CD4+CD45RA -细胞内上。根据标有物隐含深入研究出10个元簇:梦境T细胞内_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T细胞内;HLA-DR + GITR +梦境T细胞内;闪存Treg_1;闪存Treg_2;闪存Treg_3;和闪存Treg_4。(a)用到9个不同Treg标有转化成的10个元簇的MST。每个路由表都是一个炮兵部队(100个炮兵部队)，正因如此大的元炮兵部队(10个元炮兵部队)在路由表三组周围成品。每个路由表中会的饼绘出透露单个标有的隐含档次。(b)每个元聚类的热绘出，以辨识基本标有隐含。(c, d)为HD三组(c)和SP三组(d)转化成绘出，以及FlowSOM辨识的每个元簇的覆盖层。(e-l)相比之下较核素为每个metacluster箱本站绘出(核素> 0.05%)确定为HD和SP三组:闪存Treg_2 (e),闪存Treg_3 (f),闪存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T细胞内(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T细胞内(l)。紫色红色都是**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon归一化记号秩检验。此键适用于绘出形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘出2 用到CITRUS的预测模标准型证实，Treg增益的增高是成果比较慢的标志。分级相关联(a - f)和甜菜比对(g-k)比较SP举例来说和归一化的HD举例来说在CD4+CD45RA−T细胞内上的相似之处。(a)杂交CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l小团本体的都是性绘出。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR隐含同步进行转化，建模FlowSOM小团本体。(b) HD(黑点)和SP(白斑)三组以及小分叔父SP 606(紫色)中会CD25+ cd127的增益核心内容绘出。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+相关联叔父集的箱本站绘出;(c) HLA-DRloGITR−(闪存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(闪存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(闪存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+闪存T cell)。(g - i)柑桔簇棒状由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含数值纹理，标有明显的簇被辨识为SP和HD路由表彼此之间的不同。(j)箱本站绘出辨识了在SP(白斑)和HD(灰点)三组中会，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的相比之下较核素(平均值)。(k)直方绘出辨识每个簇的表标准型(粉红色)和Treg标有相比之下较隐含与或多或少隐含(黄色);上列，闪存Treg_3;请注意一行，闪存Treg_4。或多或少与所有其他簇中会标有的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon归一化记号秩检验

绘出3 与心理健康献血者相比之下，成果比较慢者梦境treg的GITR增高。每个梦境CD4+T细胞内元簇(梦境T细胞内_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T细胞内;HLA-DR + GITR +梦境T细胞内;闪存Treg_2;闪存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)监测每个隐含标有的波动。(a,b)来自HD (a)和S (b)路由表的隐含热绘出(sp606不包含在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇中会所有HD(黄褐色)、所有SP(黄色)和SP 606(紫色)的FlowSOM GITR隐含联结，辨识直方绘出(c)和核心内容绘出(d)。Wilcoxon归一化记号秩和检验，p< 0.07(紫色)所有小分叔父包含，p< 0.05(黄色)小分叔父SP 606和归一化的HD不包含在测试中会。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中会GITR隐含，从分级相关联，从所有HD(黄褐色)、所有SP(黄色)和SP 606(紫色)联结，辨识直方绘出(e)和核心内容绘出(f) *p< 0.05, Wilcoxon归一化记号秩检验

绘出4 来自比较慢成果的CD4+ treg细胞内控制振荡CD4+T细胞内的潜能提高。SP三组用黄色的本站和红色透露，HD三组用灰色的本站和红色透露，紫色的本站/红色透露小分叔父sp606。用到CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内同步进行分选。CD4+CD25−(转发者)被标有为CFSE, Treg按观察的平均值试样。用抗CD3 /28微珠再生细胞内，指导3当晚同步进行流式细胞内心法监测。(a-d)与CD4+转发者相比之下较理应的treg指导(自本体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD转发者指导。(a,b,f) CFSE游离(a,e)和CFSE抑止平均值(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止平均值。用到感染性对照(作用于的响理应细胞内则有treg)计算抑止平均值。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

绘出5 振荡CD4+T细胞内对比较慢成果的T细胞内再生的抑止更加正因如此端。SP三组用黄色的本站和红色透露，HD三组用灰色的本站和红色透露，紫色的本站/红色透露小分叔父sp606。用到CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内同步进行分选。CD4+CD25−(转发者)被cfsel标有，treg按观察的平均值试样。用抗CD3 /28微珠再生细胞内，指导3当晚同步进行流式细胞内心法(CD25反染)和细胞内因叔父比对。HD Treg与HD、SP或sp606转发者共同指导。(a,b) CFSE游离(a)和CFSE抑止百份(b)。(c,d) CD25抑止百份(c)和CD134抑止百份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共指导中会的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

结论：我们得出的结论是，来自比较慢成果叔父的再生梦境CD4+Treg在GITR隐含中会获取了扩展和丰富多彩，强调了进一步数据比对Treg在1标准型高血压风险生物本体中会的异质性的实质。

原文出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28